El corredor oeste alberga otras habitaciones que se enfrentan directamente. Estas habitaciones, después de la apertura de las nuevas habitaciones en la planta baja, están casi todas re-terminadas. La sala Niobe se ha cerrado desde la primavera de 2011 hasta el 21 de diciembre de 2012 debido a trabajos de restauración.
Sala 35 Contrarreforma Barroca y Toscana
La habitación 35 está dedicada a Federico Barocci y la Contrarreforma en Toscana, con numerosos ejemplos de los principales exponentes de la época. El gran retablo de la Madonna del Popolo se destaca del Barocci.
Sala 38 Exposiciones temporales
Sala 39-40 Vestíbulo de salida
La habitación 40 era anteriormente el vestíbulo de salida del museo. Hay varios ejemplos de estatuas clásicas y algunas pinturas, incluida una pancarta de dos lados de Sodoma.
Habitación 41 Rubens
La habitación 41 ya estaba dedicada a Rubens y ahora se usa como almacén.
Habitación 42 Niobe Room
La grandiosa sala 42 fue construida por el arquitecto Gaspare Maria Paoletti a finales del siglo XVIII para albergar las numerosas estatuas del Grupo Niobdi, una serie de estatuas romanas, una copia de los originales helenísticos traídos a Florencia en aquellos años. El mito de Niobe y sus hijos está relacionado con el amor materno, que llevó a la desafortunada mujer a jactarse tanto de su descendencia (siete machos y siete hembras) como para ser comparada con Latona, madre de Apolo y Artemisa, provocando así la ira de algunos que tomaron su revancha matando a los niños uno por uno. Las esculturas salieron a la luz en Roma en 1583 y formaron parte de los aparatos decorativos de Villa Medici (comprados por el cardenal Ferdinando), de donde fueron trasladados a Florencia en 1781, donde se expusieron directamente en esta sala. De las enormes pinturas en las paredes, dos son de Rubens (parte del ciclo incompleto de Enrique IV de Francia), uno de Giusto Sustermans y uno de Giuseppe Grisoni.
Sala 43 italiana y europea del siglo XVII
La habitación 43, ya en el siglo XVII italiano y europeo, ahora alberga solo un grupo muy selecto de obras italianas, después de que los extranjeros hayan sido trasladados a las «habitaciones azules» en el primer piso. Annibale Carracci, Domenichino, Guercino, Mattia Preti, Bernardo Strozzi y otros están representados.
Habitación 44 Rembrandt y pintura flamenca del siglo XVII
La sala 44 (Rembrandt y el flamenco) está siendo remodelada, mientras que la 45 (del siglo XVIII) se ha integrado con otras obras italianas después de que las extranjeras se hayan trasladado al primer piso. Destacan las obras de Canaletto, Giambattista Tiepolo, Francesco Guardi, Alessandro Magnasco y Rosalba Carriera. Importante para el tamaño y la calidad es el lienzo de Love and Psyche de Giuseppe Maria Crespi.
Sala del siglo 45 italiano y europeo
El entorno adyacente es el del bar, que conduce a la terraza sobre la Loggia dei Lanzi, un excelente mirador para la Piazza della Signoria, el Palazzo Vecchio y el Domo de Brunelleschi. La pequeña fuente de la terraza contiene una copia del Nano Morgante montado en un caracol, por Giambologna, hoy en el Bargello pero originalmente creado para este sitio. El bar también conduce a la nueva escalera, inaugurada en diciembre de 2011, que conduce a las habitaciones del primer piso.
Galería Uffizi
La Galería ocupa por completo el primer y segundo piso del gran edificio construido entre 1560 y 1580 y diseñado por Giorgio Vasari. Es famoso en todo el mundo por sus destacadas colecciones de esculturas y pinturas antiguas (desde la Edad Media hasta el período moderno). Las colecciones de pinturas del siglo XIV y el Renacimiento incluyen algunas obras maestras absolutas: Giotto, Simone Martini, Piero della Francesca, Beato Angelico, Filippo Lippi, Botticelli, Mantegna, Correggio, Leonardo, Raffaello, Miguel Ángel y Caravaggio, además de muchos obras preciosas de pintores europeos (principalmente alemanes, holandeses y flamencos).
Además, la Galería cuenta con una colección invaluable de estatuas y bustos antiguos de la familia Medici, que adorna los corredores y consta de copias romanas antiguas de esculturas griegas perdidas.